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豬乙腦病毒抗體檢測試劑盒

  • 更新時間:  2016-11-04
  • 產品型號:  
  • 簡單描述
  • 豬乙腦病毒抗體檢測試劑盒公司還經營生物科研試劑、分析試劑,代理許多先進水平的高科技產品,包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷等多個研究及應用領域,另一方面也非常重視自主產品研究和開發,推出了一系列具有競爭力的產品和服務。
詳細介紹

豬乙腦病毒抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)使用說明書

【產品名稱】
通用名:豬乙腦病毒抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Japanese Encephalitis Virus (ELISA)
【包裝規格】 96T×1/盒、96T×2/盒
【預期用途】 豬乙型腦炎又名日本乙型腦炎是由豬乙腦病毒(Porcine Japanese Encephalitis Virus,JEV)引起的一種蚊媒性、急性人畜共患傳染病,病豬主要表現為母豬、產死胎,公豬腫。
本試劑用于檢測豬血清中豬乙腦病毒抗體,可用于豬乙腦病毒疫苗免疫效果評價。
【原    理】
    本試劑盒系由預包被豬乙型腦炎病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬乙型腦炎病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有豬乙型腦炎病毒抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬乙型腦炎病毒抗體。
【試劑盒組成】 

序號

名稱

規格(96T×1)

規格(96T×2)

1.

酶標板

96T×1

96T×2

2.

酶標記物  (紅蓋)

11ml×1

11ml×2

3.

抗體工作液 (藍蓋)

5.5ml×1

11ml×1

4.

20X濃縮洗滌液

40ml×1

40ml×1

5.

底物液A  (白蓋)

6ml×1

11ml×1

6.

底物液B  (黑蓋) 

6ml×1

11ml×1

7.

終止液  (黃蓋) 

6ml×1

11ml×1

8.

陽性對照  (紅蓋)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

9.

陰性對照  (綠蓋)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

10.

蓋板膜

1張

2張

11.

自封袋

1個

1個

12.

說明書

1份

1份

 

【儲存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標儀,37℃恒溫設備,可調微量移液器。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6。
【檢驗結果的解釋】
1.樣品A值≥0.38為陽性;樣品A值在0.2到0.38之間為可疑;樣品A值<0.2為陰性。
2.本實驗結果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足,建議補打相應疫苗。
【試驗方法的局限性】
    該試驗僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬乙型腦炎病毒抗體,根據A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。
【注意事項】
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標板從冷藏環境中取出時應恢復至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶,使用時需恢復至室溫以完全溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮。
7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。
8.不同批號試劑組分不得混用。


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